壁虎脊髓细胞的原代培养及形态学观察

目的:探讨壁虎脊髓细胞分离及培养方法。方法:分离壁虎脊髓,消化接种于细胞培养瓶中,采用不同渗透压、pH值、温度、消化、粘附基质的培养条件。结果:5%CO2、饱和湿度培养条件,在添加10%FBS的DMEM/F12培养基(渗透压200～260mmol/kg,pH7.2)中,获得了不同细胞类型的细胞,其中包括神经元样和胶质细胞样细胞,神经元样细胞NF染色阳性,GFAP染色阴性,而胶质样细胞GFAP染色阳性。结论:建立了壁虎脊髓细胞分离及培养方法,为壁虎脊髓再生过程中基因的研究提供细胞水平功能平台。

C_6胶质瘤细胞培养上清诱导神经干细胞迁移的初步研究

目的:观察体外培养的胶质瘤细胞在体外能否引起神经干细胞的迁移,从而为研究胶质瘤细胞中存在促进神经干细胞迁移的物质打下基础。方法:分别培养神经干细胞、星形胶质细胞和C6胶质瘤细胞。以星形胶质细胞为对照,做细胞迁移实验,观察其结果;将C6胶质瘤细胞、星形胶质细胞的无血清培养上清分别浓缩,并行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,观察其结果。结果:(1)C6胶质瘤细胞的培养上清引起神经干细胞迁移的数目明显多于星形胶质细胞的培养上清和新鲜无血清培养基(P<0.01);(2)将无血清培养的等浓度的C6胶质瘤细胞、星形胶质细胞的上清浓缩蛋白电泳,可见二者蛋白条带存在明显差异。结论:(1)从新生大鼠大脑皮层组织可以培养出神经干细胞和星形胶质细胞。(2)C6胶质瘤细胞无血清培养的上清中存在着能够诱导神经干细胞迁移的物质。

NGF诱导大鼠胚脑皮层和隔区神经干细胞向神经元和AChE阳性神经元分化的作用

目的:探讨大鼠胚脑皮层和隔区神经干细胞在NGF的诱导下分化为神经元和AChE阳性神经元的情况。方法:应用无血清培养技术,分别从SD大鼠胚脑皮层和隔区分离克隆神经干细胞,然后在含或不含NGF的培养液中分化14d。用MAP-2免疫荧光和AChE组化技术检测神经干细胞分化为神经元和AChE阳性神经元的情况。并对MAP-2阳性神经元的分化率、AChE阳性神经元数及其它们的细胞面积和周长进行图像处理;用STATA7.0统计软件进行方差分析和两两比较。结果:隔区和皮层NGF组MAP-2阳性神经元分化率高于隔区和皮层对照组;其细胞面积除隔区NGF组与皮层NGF组之外,其它各组间差异均有统计学意义;而其周长各组之间差异均有统计学意义。AChE阳性神经元的数量及细胞面积和周长,隔区NGF组最佳,皮层NGF组次之,隔区对照组再次之,皮层对照组较差。三项指标各组间差异有统计学意义。结论:NGF可诱导大鼠胚脑皮层和隔区神经干细胞向神经元分化;隔区神经干细胞较皮层神经干细胞更易于向AChE阳性神经元分化;这种区域特异性可在NGF诱导下发生改变。

肺癌外周血中EGFR mRNA、SP-D mRNA、LUNX mRNA表达的临床意义

目的:应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测肺癌患者肿瘤组织和外周血中EGFRmRNA、SP-DmRNA、LUNXmRNA的表达,探讨其作为肺癌微转移检测分子标志物的可行性。方法:应用RT-PCR技术检测40例非小细胞肺癌组织和15例肺良性病变组织中EGFRmRNA、SP-DmRNA、LUNXmRNA的表达;检测40例肺癌患者外周血中靶基因的表达,并以15例良性肺疾病患者和10名健康人外周血作为对照。结果:40例肺癌患者病理组织中EGFRmRNA、SP-DmRNA、LUNXmRNA的表达率为77.5%(31/40)、100%(40/40)、100%(40/40),外周血中EGFRmRNA、SP-DmRNA、LUNXmRNA表达阳性率分别为55.0%(22/40)、52.5%(21/40)和57.5%(23/40);对照组中15例肺良性病变患者病理组织中EGFRmRNA表达率为13.3%(2/15),无SP-DmRNA和LUNXmRNA表达,15例肺良性病变患者和10名健康人的外周血中无EGFRmRNA、SP-DmRNA、LUNXmRNA表达。结论:EGFRmRNA、SP-DmRNA、LUNXmRNA作为检测肺癌组织及肺癌外周血微转移的分子标志物具有良好的敏感度和特异性;三者表达与肺癌TNM分期、组织学类型和癌细胞分化程度关系密切。

β1,4-半乳糖基转移酶I影响雪旺氏细胞增殖的机制

目的:探讨β1,4-半乳糖基转移酶I影响雪旺氏细胞增殖的机制。方法:将不同浓度的β-1,4-GalT-I表达质粒转染雪旺氏细胞,采用Westernblot方法检测增殖相关信号分子cyclinD1、p16INK4以及p27Kip1的表达水平,North-ernblot方法检测p19ARF的表达变化。结果:随着β-1,4-GalT-I在雪旺氏细胞中的表达增加,cyclinD1表达降低,而p16INK4a和p19ARF呈现相反的变化;p27Kip1变化不明显。结论:β-1,4-GalT-I影响雪旺氏细胞增殖可能与cyclinD1、p16INK4a和p19ARF介导的信号传导途径有关。

臂丛神经自控镇痛对断肢(指)再植患者免疫功能的影响

目的:探讨臂丛神经自控镇痛对断肢(指)再植患者免疫功能的影响。方法:断肢(指)再植30例术后随机分为患者臂丛神经自控镇痛(PCRA)和患者静脉自控镇痛(PCIA)组,分别于术前(T0)、术后即刻(T1)、术后第1天(T2)、术后第3天(T3)、术后第5天(T4)测定血液中细胞因子、C-反应蛋白(CRP)、皮质醇以及免疫细胞(中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞)以了解免疫功能状况。结果:与PCIA组比较,PCRA组循环细胞因子白细胞介素-6(IL-6)、IL-8、IL-10、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和应激反应指标CRP和皮质醇等的浓度均无明显变化。此外单核细胞数差异也无统计学意义,但PCRA组术后B淋巴细胞和T-辅助细胞明显减少,自然杀伤(NK)细胞也明显减少。结论:术后臂丛神经自控镇痛对单核细胞功能没有影响,但可使自然杀伤细胞数减少。因此臂丛神经自控镇痛可影响特异性免疫系统,而对先天性免疫系统无影响,并可能减轻与抗感染能力有关的术后淋巴细胞抑制。

肾脏黏液性小管状和梭形细胞癌临床病理观察

目的:探讨肾脏黏液性小管状和梭形细胞癌的临床病理特点及鉴别诊断要点。方法:对肾脏粘黏性小管状和梭形细胞癌进行临床病理学分析及免疫组化的研究。结果:肿瘤境界清楚,切面灰白。镜下肿瘤与周围肾组织境界清楚,由紧密排列的、小而狭长、相互构通的小管构成。小管由立方和梭形细胞组成,可见平滑肌瘤样的梭形细胞灶。肿瘤间质黏液样。免疫组化示肿瘤细胞CK、EMA、CD15和VIM(+),CD10(-)。结论:肾脏黏液性小管状和梭形细胞癌是一种低度恶性的肾肿瘤,肿瘤细胞核圆形或梭形,异型性很小,可能来源于远端肾单位。

鼻内窥镜术治疗霉菌性鼻窦炎的临床研究

目的:研究鼻内窥镜术治疗霉菌性鼻窦炎的手术方法及术后抗真菌药物的应用与疗效的关联性。方法:霉菌性鼻窦炎26例均采用单径路鼻内窥镜手术治疗。术后将患者随机分为两组,一组用生理盐水冲洗窦腔,另一组用氟康唑冲洗窦腔,并口服酮康唑1周。结果:所有病例均治愈,无并发症及复发,术后两组病例的愈合时间差异无统计学意义。结论:单径路鼻内窥镜术治疗霉菌性鼻窦炎是可行的,术后无需应用抗真菌药物。

南通地区2型糖尿病综合控制影响因素研究

目的:研究2型糖尿病综合控制的影响因素。方法:分析213例患者年龄、性别、病程、文化程度、收入、是否医保、并发症、肥胖程度、是否减肥、空腹血糖水平等与糖尿病综合控制情况评价量表得分的关系。结果:年龄与总分负相关(r=-0.17,P<0.05),文化程度(r=0.45,P<0.01)、经济收入(r=0.25,P<0.01)与总分呈正相关,女性总分低于男性(224.10±32.11vs211.97±39.00,P<0.05),病程、家族史、是否减肥与量表有不同程度相关性,肥胖程度、空腹血糖水平及有无并发症、是否医保与总分不相关。结论:年龄、性别、文化程度、经济收入是影响糖尿病综合控制的主要因素。

下肢骨关节手术深静脉血栓16例形成要素和预防

目的:分析16例深静脉血栓(DVT)患者形成的全身因素、手术方法和进一步治疗措施。方法:2001年3月￣2004年12月对481例患者下肢手术(包括髋、膝关节置换,股骨髓内钉固定)围手术期DVT高危患者63例作筛选并预防,术后回顾性分析并随访。结果:术后发生深静脉血栓16例,临床(有症状)发生率仅为3.3%,治疗后有并发症2例。结论:对下肢骨关节手术围手术期有DVT形成要素高危患者作筛选并早作预防,术中术后积极应对有利于减少DVT发生。

空肠原位间置代胃术12例临床分析

目的:探讨空肠原位间置代胃术在全胃切除术后消化道重建中的价值。方法:将36例胃癌全胃切除术患者按消化道重建术式不同分为3组,A组:食管空肠Roux-en-Y吻合术组;B组:食管空肠“P”襻加Roux-en-Y吻合术组;C组:食管空肠原位间置代胃术组。比较3组患者术后的生活质量、预后营养指数(PNI)、体重、血液营养学指标、胃肠激素水平,判断各术式之优劣。结果:C组患者各种参数指标均优于A、B两组,比较差异均具有统计学意义。结论:空肠原位间置代胃术是一种比较合理的重建术式。

氯胺酮异丙酚辅助腰-硬膜外麻醉在妇科腹腔镜术中应用

目的:观察小剂量氯胺酮异丙酚辅助腰-硬联合麻醉在妇科腹腔镜手术时对患者循环呼吸系统的影响。方法:选择心肺功能良好的妇科腹腔镜手术40例患者行腰麻-硬膜外麻醉。麻醉成功后随机分为两组,每组20例,Ⅰ组气腹前静脉注射氯胺酮0.4mg/kg、异丙酚1.5mg/kg。术中以异丙酚2mg/kg·h及氯胺酮0.4mg/kg·h微泵持续静脉输注。Ⅱ组则于气腹前给予芬太尼1μg/kg、异丙酚1.5mg/kg,术中以异丙酚2mg/kg·h微泵持续静脉输注;观察注药后各时段收缩压、舒张压、心率、心电图、脉搏氧饱和度的变化及苏醒时间、异丙酚用量及不良反应。结果:Ⅱ组静脉注射后5min时血压明显下降,心率减慢,脉搏氧饱和度受影响需辅助呼吸;Ⅰ组(氯胺酮组)在用药后各时点各项监测指标变化不明显。Ⅰ组苏醒时间略长于Ⅱ组,但无恶心、呕吐及谵妄等不良反应。结论:小剂量氯胺酮伍用异丙酚辅助腰麻-硬膜外联合麻醉行妇科腹腔镜手术循环系统稳定,呼吸抑制较轻,是安全可行的。

残角子宫并内膜异位症伴右侧肾缺如1例

贲门癌120例根治术中WGW吻合器的应用

目的:探讨WGW型消化道吻合器在治疗贲门癌中的临床价值。方法:对贲门癌根治术120例行WGW型消化道吻合器吻合的临床资料进行回顾性分析。结果:120例术后均无吻合口瘘发生,吻合口出血3例(2.5%),吻合口狭窄6例(5.0%)。结论:运用消化道吻合器简化了手工操作,缩短了手术时间,提高了手术质量。

宫腔镜联合B超在宫内节育器取出困难41例中的应用

高乌甲素用于老年患者腹部术后自控皮下镇痛20例

白带多项检查快速染色技术在妇科白带检查中的应用

改良鼻塞持续气道正压通气治疗新生儿急性呼衰36例护理体会

高分辨率光学显微术在生命科学中的应用

提高光学显微镜分辨率的研究主要集中在两个方面进行,一是利用经典方法提高各种条件下的空间分辨率,如用于厚样品研究的SPIM技术,用于快速测量的SHG技术以及用于活细胞研究的MPM技术等。二是将最新的非线性技术与高数值孔径测量技术(如STED和SSIM技术)相结合。生物科学研究离不开超高分辨率显微术的技术支撑,人们迫切需要更新显微术来适应时代发展的要求。近年来研究表明,光学显微镜的分辨率已经成功突破200nm横向分辨率和400nm轴向分辨率的衍射极限。高分辨率乃至超高分辨率光学显微术的发展不仅在于技术本身的进步,而且它将会极大促进生物样品的研究,为亚细胞级和分子水平的研究提供新的手段。

增殖诱导配体研究的结构、相关受体及功能