- 周晓芳;陈倩;储钰丹;王学谦;钱天梅;陆仁飞;顾星星;
目的:制备针对多疣壁虎SPARCL1的多克隆抗体,为深入研究SPARCL1基因功能奠定基础。方法:构建pGEX-4T1-SPARCL1质粒,在大肠杆菌BL21表达GST-SPARCL1蛋白,经亲和层析纯化后免疫新西兰大白兔,获得SPARCL1抗血清,经酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测SPARCL1抗血清的效价,Western blot和免疫组化法检测多克隆抗体特异性。结果:成功构建多疣壁虎SPARCL1基因的原核表达质粒pGEX-4T1-SPARCL1,诱导得到较高纯度的GST-SPARCL1融合蛋白,免疫兔获得SPARCL1抗血清,经Western-blot及免疫组织化学实验显示所得抗体具有较高的效价及特异性。结论:成功获得较高效价特异性强的SPARCL1抗血清,为进一步深入研究多疣壁虎SPARCL1功能提供抗体工具。
2011年02期 v.31;No.132 79-82+86+2页 [查看摘要][在线阅读][下载 1099K] - 沈双;王凤鸣;王婷;陈礼文;於葛华;张学光;
目的:建立稳定表达人协同刺激分子GL50的转基因细胞,探讨其体外对T细胞活化与增殖的协同刺激效应。方法:RT-PCR法从人B淋巴瘤Daudi细胞中克隆人GL50编码区全长基因,经EcoR I和BamH I双酶切后插入pIRES2-EGFP真核表达载体,构建pIRES2-EGFP-GL50重组子。用脂质体法转染小鼠成纤维L929细胞株,经G418长期加压筛选,免疫荧光标记和流式细胞术分析GL50分子在L929/GL50细胞膜上的表达,CCK-8法和酶联免疫吸附测定法(ELISA)分析L929/GL50转基因细胞对T淋巴细胞体外增殖与活化的影响。结果:成功建立稳定表达GL50分子的L929/GL50转基因细胞。该转基因细胞在体外能显著地促进T细胞增殖;促进T细胞的活化及其对IL-4、IL-10和IL-17等细胞因子的分泌。结论:ICOS/GL50信号在机体免疫应答过程中发挥了重要作用,GL50转基因细胞的成功构建为进一步研究ICOS/GL50分子的生物学功能奠定了物质基础。
2011年02期 v.31;No.132 83-86页 [查看摘要][在线阅读][下载 257K] - 刘德丽;周旭科;姜玉婷;高玉振;
目的:调查D12S391和D6S1043基因座在江苏汉族人群的群体遗传学数据,为亲子鉴定和个人识别工作提供数据基础。方法:利用AmpF1STR Sinofiler试剂盒进行多重PCR扩增,3130型遗传分析仪进行毛细管电泳,Gen-eMapper软件自动分析各基因座的基因型。PowerStats软件计算两个基因座的等位基因频率、杂合度、个人识别机率、非父排除率及多态信息含量等群体遗传学参数,χ2检验验证Hardy-Weinberg平衡。结果:D12S391和D6S1043基因座在江苏汉族群体中均有较高的多态性,其非父排除概率和个人识别率分别为0.616、0.638、0.946和0.964。两个基因座的基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05)。结论:本研究获得了D12S391和D6S1043两个基因座在江苏汉族群体的群体遗传学数据,分析结果显示这两个基因座适合江苏汉族群体法医学应用。
2011年02期 v.31;No.132 87-88+91页 [查看摘要][在线阅读][下载 113K] - 董亮;孙茂民;匡玉庭;王守立;王影影;纪辉;柴玉海;
目的:根据大肠癌肝转移模型的手术损伤程度筛选合适的建模方法。方法:以BALB/c小鼠为对象,随机分为3组,分别经直肠黏膜内、腹腔外脾内和腹腔内脾原位等方法注射0.2 mL鼠结肠癌细胞株CT26(浓度106个/mL),观察小鼠成瘤情况、肝转移率,并用酶联免疫吸附实验检测各组小鼠建模后5 d INF-γ的表达水平。结果:3种方法均能建立大肠癌肝转移模型,直肠黏膜内、腹腔外脾内和腹腔内脾原位注射法的肝转移率分别为37.5%、87.5%和87.5%;各组建模7 d后血清中INF-γ的水平分别为345.8、1 085.2和680.4 pg/mL,腹腔外脾内注射法INF-γ的表达水平较其它2组明显增高(P<0.05)。结论:脾内原位注射法是一种建立大肠癌肝转移最有效且损伤最小的一种方法,比较适合用来研究大肠癌肝转移的相关分子机制。
2011年02期 v.31;No.132 89-91+2页 [查看摘要][在线阅读][下载 648K] - 李耀东;周亚军;
在诊治营养不良和超重体力劳动者的临床实践中,发现营养不良可引起肿瘤。因而有针对性的对一些肿物(包括颌下腺囊肿和腋窝囊肿等)单独注射硫胺素(维生素B1)。发现疗效很好,本文对1例溶骨性骨肉瘤注射硫胺素,经围绕癌瘤一次注射硫胺素300 mg后,癌块急剧缩小50%以上。国际上对硫胺素是否致癌或治癌尚有争议,本文以临床实践为依据,提出硫胺素缺乏可能是骨肉癌的病因之一。
2011年02期 v.31;No.132 92-93页 [查看摘要][在线阅读][下载 83K] - 张沐;庄文明;杨晓清;叶佳;刘沅林;张玉泉;
目的:探讨宫腔镜术时灌流介质经输卵管溢出的影响因素,及其是否引起子宫内膜癌细胞的扩散。方法:收集27例非子宫内膜癌患者全子宫+双附件切除术后的离体标本,在不同膨宫压力值下行宫腔镜灌注,观察输卵管溢液情况。另外收集12例子宫内膜癌患者全子宫+双附件切除术后的离体标本,在100 mmHg的膨宫压力值下行宫腔镜灌注,收集输卵管溢液,分离、离心后找癌细胞。结果:术中钳夹输卵管组溢液率明显低于未钳夹组(P<0.01);膨宫压力40 mmHg时输卵管即有溢液,且随着膨宫压力的增大,溢液速度加快;正常大小子宫与大于正常子宫的输卵管溢液率差异无统计学意义。子宫内膜癌患者离体标本的输卵管溢液经分离、离心后未找到癌细胞。结论:输卵管溢液与膨宫压力及输卵管是否通畅有关,与子宫大小无关。宫腔镜膨宫介质灌注子宫内膜癌离体子宫标本,未能将癌细胞经输卵管带出。
2011年02期 v.31;No.132 94-97页 [查看摘要][在线阅读][下载 138K] - 车彦军;刘灿均;陈静;张志军;周谊芬;倪衡建;
目的:探讨颅脑损伤后垂体前叶细胞缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、Bcl-2和Bax的表达及细胞凋亡情况。方法:采用Feeney自由落体方法制作大鼠颅脑损伤模型,分别于建模后24、72 h和7 d灌注固定取材,同时设立对照组,免疫组化染色法检测HIF-1α、Bcl-2和Bax蛋白的表达,TUNEL染色法检测细胞凋亡。结果:垂体前叶组织于伤后24 h HIF-1α、Bcl-2和Bax蛋白的表达即有升高,72 h达到高峰,一直持续到伤后7 d,与对照组相比较差异均有统计学意义(P<0.05);TUNEL染色显示凋亡细胞明显增多,且凋亡指数与HIF-1α的表达和Bcl-2/Bax的比值成规律性变化。结论:颅脑损伤后垂体前叶组织HIF-1α、Bc1-2、Bax蛋白的表达增加而诱发细胞凋亡,是颅脑损伤后垂体前叶功能紊乱的重要原因。
2011年02期 v.31;No.132 98-100+2页 [查看摘要][在线阅读][下载 626K] - 曾赟;
目的:观察环孢菌素A对K562细胞株凋亡的影响及其作用机制。方法:采用瑞氏染色、流式细胞术观察环孢菌素A对K562细胞株凋亡的影响;采用流式细胞仪检测环孢菌素A影响K562细胞凋亡时Bcl-2基因表达的改变情况。结果:20μmol/L环孢菌素A作用24 h可诱导K562细胞凋亡,瑞氏染色呈现典型的凋亡形态学改变,流式细胞术显示凋亡峰,细胞周期分析发现环孢菌素A可使K562细胞生长阻滞于G0~G1期。环孢菌素A处理组的凋亡率高于对照组(P<0.01);环孢菌素A处理组的Bcl-2蛋白阳性率低于对照组(P<0.01)。结论:环孢菌素A可诱导K562细胞株凋亡,其机制可能是通过下调Bcl-2基因表达。
2011年02期 v.31;No.132 101-102+105页 [查看摘要][在线阅读][下载 117K] - 王磊;谭谦;胡克苏;张逸;顾海鹰;
目的:观察丹参-丝蛋白多功能创面敷料用于大鼠浅二度烧伤创面覆盖后对局部表皮生长因子(EGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和血小板衍生生长因子(PDGF)释放的影响。方法:SPF级雄性SD大鼠40只,体重230~250 g。将动物随机分为4组,每组10只动物。所有动物于背部造成浅二度皮肤烫伤。创面分别覆以消毒凡士林纱布,丝蛋白创面敷料,丹参注射液纱布,丹参-丝蛋白多功能敷料,外敷无菌纱布包扎。于手术术后3 d处死取材,采用组织培养和比色法测定创面组织释放EGF、bFGF以及PDGF-AB水平,并通过HE和Masson染色对创面组织坏死程度进行形态学观察。结果:实验组与对照组创面组织释放EGF、bFGF以及PDGF-AB水平有明显差异(P均<0.01)。而实验组中丹参注射液组与丝蛋白敷料组无明显差异,丹参-丝蛋白敷料组与其他2组有明显差异。结论:丹参-丝蛋白多功能敷料能促进大鼠浅二度烫伤创面局部生长因子的释放,对创面的愈合有促进作用。
2011年02期 v.31;No.132 103-105页 [查看摘要][在线阅读][下载 114K] - 张希峰;李强;杨宗华;唐天驷;
目的:探讨后路经椎间孔椎体间融合术进行腰椎滑脱治疗的效果。方法:自2006年5月-2009年5月,对21例(23节段)腰椎滑脱患者进行TLIF手术,患者包括男7例,女14例;年龄42~67岁,平均53.6岁,根据Meyerding分级标准,Ⅰ度滑脱7例,Ⅱ度滑脱14例,术中选择采用Sofamor Danek公司TENOR、CDHM8或BASIS内固定系统,Sofamor Danek公司TELAMON或钛网,或CAPSTONE Peek材料融合器,术后随访包括JOA腰背痛评分标准评分、常规X线摄片、CT扫描。结果:21例患者平均随访时间26.5个月,无1例出现感染、断钉、椎间融合器下沉、后移等并发症,1例术后出现神经症状,经药物治疗后好转。手术腰椎节段不同程度融合,椎间隙高度、椎体滑移距离、腰椎前突弧度不同程度改善,融合率为90.5%,腰背痛评分统计:术前(14.8±4.2)分,术后(24.9±3.5)分,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:TLIF是一种安全、有效、微创的技术;CT扫描可以简单、精确评估椎体融合情况。
2011年02期 v.31;No.132 106-108+112页 [查看摘要][在线阅读][下载 675K] - 李姗姗;董志珍;杨君伶;姚登福;
目的:定量检测肝病患者外周血缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达水平,以探讨血HIF-1α浓度作为肝细胞性肝癌(HCC)诊断及预后监测的临床价值。方法:收集不同肝病患者外周血220份及正常健康对照外周血27份,以酶联免疫吸附法(ELISA)定量检测肝病患者血清HIF-1α表达水平,与AFP对照分析其临床意义。结果:在肝病发展过程中,血清HIF-1α表达呈梯度增加,HCC患者血HIF-1α表达显著高于良性肝病患者(P<0.001),与肿瘤大小、有无肝外转移明显相关(P<0.05),与患者的年龄、性别、AFP浓度及HBsAg阳性与否间差异无统计学意义(P>0.05)。受试者工作曲线显示,血HIF-1α面积水平为0.909,血HIF-1α表达水平异常,有助于HCC的诊断。结论:HIF-1α过表达与HCC的发生、发展相关,外周血HIF-1α异常是HCC诊断和转移监测的良好标志物。
2011年02期 v.31;No.132 109-112页 [查看摘要][在线阅读][下载 158K] - 柯宏刚;丁海兵;董汉宣;
目的:探讨早期使用Caspase抑制剂z-VAD-fmk对吸烟型肺气肿大鼠肺泡结构保护的机制。方法:30只清洁级SD大鼠平均随机分为对照组(A组)和肺气肿模型组(B组)和z-VAD-fmk干预组(C组)。12周后取肺组织制作石蜡切片,光镜下观察肺泡病理改变。原位缺口末端标记法(TUNEL)检测各组大鼠肺泡隔细胞凋亡指数(apoptosis index,AI),免疫组化检测肺组织中Bcl-2和Bax蛋白的表达情况。结果:12周末光镜显示:B组较C组肺气肿特征性病理改变逐渐加重,A组无肺气肿表现。各组肺泡隔细胞AI,B组与A、C组相比差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组化显示B组Bax蛋白表达呈强阳性,而Bcl-2蛋白表达相对较弱,与A、C组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:肺气肿形成初期,使用Caspase-3抑制剂z-VAD-fmk可显著上调肺组织中Bcl-2蛋白表达,抑制Bax蛋白的表达,使肺泡隔细胞凋亡减少,明显减轻肺气肿的病理改变。
2011年02期 v.31;No.132 113-114+118页 [查看摘要][在线阅读][下载 117K] - 陆志方;丁银霞;夏春林;单臣;
目的:探讨新生儿窒息对新生儿臂丛神经损伤(NBPP)发生的影响程度。方法:采集102例NBPP病例资料和2 937例正常新生儿资料,对2组资料中难产、手术助产、出生体重≥4 000 g及新生儿窒息等因素采用完全随机设计的χ2检验,并进一步用单因素和多因素logistic模型分析。结果:难产、手术助产、新生儿出生体重≥4 000 g和新生儿窒息史,NBPP病例组与对照组之间的差异均有统计学意义(P<0.001);遭遇难产、手术助产(胎吸、产钳、2种以上方式)、出生体重≥4 000 g和有窒息史的新生儿患NBPP的风险分别增加约28倍(OR=29.0,95%CI=13.1~64.5),17~150倍(OR=18.6,95%CI=7.4~46.9;OR=16.9,95%CI=4.9~58.9;OR=151.7,95%CI=73.2~207.2),41倍(OR=42.4,95%CI=19.7~91.3)和130倍(OR=131.8,95%CI=52.8~328.9)。结论:新生儿窒息与难产、手术助产(胎吸、产钳)和新生儿出生体重≥4 000 g一样,是NBPP发生的高危因素。
2011年02期 v.31;No.132 115-118页 [查看摘要][在线阅读][下载 157K] - 杨卫霞;黄锋;吴尤佳;徐杰;孙宝兰;龚红蕾;
目的:探讨肥胖儿童非酒精性脂肪肝炎(NASH)与胰岛素、瘦素抵抗的关系。方法:对符合NASH诊断的23例患儿,符合单纯性肥胖诊断的17例儿童及20例正常儿童分别检测血谷丙转氨酶、游离脂肪酸、甘油三酯、胰岛素、瘦素,比较它们的水平并分析谷丙转氨酶与各指标的关系。结果:NASH组患儿血游离脂肪酸、甘油三酯、胰岛素、瘦素水平高于单纯肥胖组和对照组(P<0.05)。相关分析显示谷丙转氨酶与游离脂肪酸、甘油三酯、胰岛素、瘦素和HOMA-R各指标间存在正相关(r=0.407,r=0.32,r=0.338,r=0.384,r=0.524;P<0.01,P<0.05,P<0.05,P<0.05,P<0.01)。结论:NASH患儿存在着血脂升高、高胰岛素和高瘦素血症,瘦素抵抗与胰岛素抵抗单独或共同构成NASH的发病因素之一。
2011年02期 v.31;No.132 119-120+124页 [查看摘要][在线阅读][下载 116K] - 赵喜;黄金华;仇雯倩;陶金华;徐济良;
目的:观察螺内酯、厄贝沙坦单用及其联用对肾血管性高血压大鼠(RHR)心室肥厚的影响。方法:采用两肾一夹(2K1C)法在SD大鼠中建立肾血管性高血压大鼠模型。随机分为5组:假手术组(Sham组)、肾性高血压组(RHR组)、螺内酯组(Spi组)、厄贝沙坦组(Irb组)及联合用药组(Com组),每两周测定大鼠尾动脉收缩压。连续给药8周后检测心脏指数和心室总蛋白含量等心肌肥厚指标。放免法检测血浆及心肌中AngⅡ、醛固酮水平。结果:RHR血压显著升高,大鼠心脏指数及心室总蛋白含量明显增加,药物治疗8周后Spi组收缩压稍降低(P>0.05)、Irb组与Com组收缩压显著降低(P<0.01);各治疗组均可降低心脏指数、心肌总蛋白含量和心肌细胞大小,其中Com组效果优于单用组(P<0.01或P<0.05)。结论:螺内酯和厄贝沙坦联合应用对改善肾血管性高血压大鼠心室肥厚明显优于单用。
2011年02期 v.31;No.132 121-124页 [查看摘要][在线阅读][下载 151K] - 陆凯明;侯健全;欧阳骏;潘浩;王祖峰;
目的:探讨端粒酶活性与膀胱癌之间的关系。方法:采用TRAP-ELISA法对膀胱癌组织和癌旁正常膀胱组织中端粒酶活性进行检测。结果:膀胱癌组织和癌旁正常膀胱组织中端粒酶活性阳性率差异有统计学意义(P<0.01);高分化组与低分化组差异有统计学意义(P<0.05);早期膀胱癌组与中晚期膀胱癌组端粒酶活性差异有统计学意义(P<0.05)。结论:膀胱癌组织中端粒酶活性较正常组织活性高,膀胱癌端粒酶活性与其恶性程度有相关性,故端粒酶活性测定可作为早期诊断膀胱癌的标志物。
2011年02期 v.31;No.132 125-127页 [查看摘要][在线阅读][下载 119K] - 杨长刚;陆松华;景仕银;吴斌;陈海生;
目的:探讨食管癌贲门癌患者术后早期肠内营养治疗的效果、安全性及可行性。方法:255例老年食管癌、贲门癌患者随机分成肠内营养组(EN组,130例)和肠外营养组(PN组,125例),分别监测手术前后体重、白蛋白、前白蛋白、血红蛋白,观察术后肛门恢复排气排便时间,肺部感染、术野感染、心律失常、心衰发生情况并作对照分析。结果:EN组在营养支持治疗后与PN组比较,肛门恢复排气排便时间明显缩短,体重、白蛋白、前白蛋白、血红蛋白明显升高(P<0.01),并发肺部感染、术野感染、心律失常、心衰等明显减少(P<0.01)。结论:老年食管癌、贲门癌术后早期肠内营养治疗能有效改善机体营养状况,提高免疫能力,促进肠道功能恢复,减少感染,积极预防心肺并发症,值得临床推广。
2011年02期 v.31;No.132 128-130+133页 [查看摘要][在线阅读][下载 144K] - 孙锦秀;
目的:研究提取桑黄总黄酮的工艺。方法:以正交试验,采用超声辅助提取桑黄中总黄酮,以总黄酮提取率为指标。结果:超声法提取桑黄总黄酮为最佳工艺:其乙醇浓度为70%,料液比为1∶30(g/mL),提取时间为20 min,颗粒粗细度为40~60目。结论:超声波法提取桑黄总黄酮提取率高,成本低廉,方法简单。
2011年02期 v.31;No.132 131-133页 [查看摘要][在线阅读][下载 106K] - 花敏慧;刘春花;张玉泉;
目的:研究宫颈癌及宫颈癌前病变患者宫颈脱落细胞中死亡相关蛋白激酶Ⅰ(DAPKⅠ)和β视黄酸受体(RARβ)甲基化情况及其与高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染的关系。方法:取宫颈炎患者48例、宫颈轻中度鳞状上皮内瘤变(CINⅠ/CINⅡ)患者14例,重度鳞状上皮内瘤变(CINⅢ)14例,宫颈浸润性鳞癌(ICC)患者28例,采集其宫颈脱落细胞,用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测DAPKⅠ、RARβ甲基化情况,用HPV分型检测法检测高危型HPV感染情况。结果:在宫颈炎、CINⅠ/CINⅡ、CINⅢ和ICC组中DAPKⅠ甲基化率分别为2.08%、14.28%、50.00%、60.71%,RARβ甲基化率分别为4.55%、7.69%、42.86%、53.57%,高危型HPV感染率为33.33%,50%,71.43%和89.29%。DAPKⅠ、RARβ甲基化与高危型HPV感染的相关系数分别为0.48和0.46。结论:DAPKⅠ、RARβ甲基化是宫颈癌发生的早期事件,DAPKⅠ、RARβ甲基化与高危型HPV感染呈正相关。
2011年02期 v.31;No.132 134-136页 [查看摘要][在线阅读][下载 241K] - 陈强;邢春根;吴永友;陈伟;谷春伟;吕孝东;王浩炜;吴浩荣;
目的:分析腹腔镜和传统直肠癌根治术近期疗效差异。方法:对我院2003-2008年间收治的56例直肠癌病例行回顾性对照分析。结果:腹腔镜组手术时间长于传统手术,术后血红蛋白、白蛋白下降较传统手术明显。腹腔镜组胃肠功能恢复早,术后发热时间短,并发症少。2组住院时间、费用,淋巴结数量、标本长度、下切缘长度相比差异无统计学意义。结论:腹腔镜直肠癌手术并发症少,恢复快、痛苦小,但腹腔镜术后水钠潴留导致血红蛋白、白蛋白浓度下降更为明显。
2011年02期 v.31;No.132 137-139+141页 [查看摘要][在线阅读][下载 144K] - 项斌;刘兵团;刘鹏飞;
目的:探讨骨桥蛋白(osteopontin,OPN)在结肠癌中的表达情况,并分析其与肿瘤临床病理特征之间的关系。方法:应用免疫组织化学法检测OPN在48例肠癌及20例癌旁组织中的表达。结果:(1)OPN在结肠癌组织中的阳性表达率(75.0%)较癌旁组织高,且差异有统计学意义(P<0.05);(2)OPN的表达与结肠癌的淋巴转移和肿瘤浸润深度相关(P<0.05)。结论:OPN在结肠癌中呈过度表达,且与恶性肿瘤的侵袭、转移有关,提示OPN可作为结肠癌浸润、转移及评估预后的一项重要指标。
2011年02期 v.31;No.132 140-141+2页 [查看摘要][在线阅读][下载 569K]